技術支持Article
PPA制備與使用的基本技術
點擊次數：3428 更新時間：2014-12-29
PPA制備與使用的基本技術
- 將初步純化的SPA與HRP用過碘酸鈉氧化法（交聯反應時間在22℃下5h）交聯。
- 將上述PPA溶液過Sephadex G-100柱，條件同前。所收集的第1管至第22管的合并液，是PPA存在的主要組分，可用ELISA塑料平板法檢測活性。將合并液濃縮，然后加入30%左右甘油，貯于4℃冰箱備用
PPA的使用
- PPA-ELISA法。基本上與ELISA法相同，PPA代替了酶標抗抗體。在進行微量反應板測定時，PPA常常加入0.1ml,稀釋度一般在1：2至1：100（應按不同情況試驗）。PPA與IgG是化學共價結合，反應時間不宜過長，不應超過2h，控制在30min-60min,反應時間過長會使PPA吸附到塑料載體上去。
- 用PPA進行組織內有關抗原的定位。甲醛對PPA有顯色影響，因此組織不可用甲醛固定，可用甲醛、乙醇等。PPA對組織內抗原（先與IgG結合）的定位，反應時間可以延長，便于滲透入組織細胞內，且沒發現嚴重的物理吸附現象。
- 在PPA實驗中稀釋液常用含0.5%（v/v）Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1緩沖液（2.42gTris溶于蒸餾水后用0.1N HC1調pH至7.4，然后加蒸餾水定容至1000ml,zui后加0.5ml Tween 20）。
- 上海研謹生物公司對外承接RT-PCR技術服務、細胞培養技術服務、原位雜交技術服務、免疫沉淀技術服務、Western Blotting技術服務、動物模型構建服務、SCI論文服務、PCR實驗服務，并為廣大科研用戶提供各種高品質的試劑和服務，如細胞、血清、Elisa試劑盒、質粒提取試劑盒、DNA產物純化試劑盒、病毒RNA提取試劑盒、PCR等產品，針對以上各項服務，我們均有具有豐富服務經驗和深厚專業背景的人員團隊為您提供技術服務和支持。
